cfpdБюллетень физиологии и патологии дыханияBulletin Physiology and Pathology of Respiration1998-5029Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания10.36604/1998-5029-2023-89-25-35cfpd-1111Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯORIGINAL RESEARCHСостояние мембранного потенциала митохондрий в лейкоцитах периферической крови больных хронической обструктивной болезнью легкихThe state of mitochondrial membrane potential in peripheral blood leukocytes of patients with chronic obstructive pulmonary diseaseСугайлоИ. Ю.SugayloI. Yu.

Ивана Юрьевна Сугайло, кандидат медицинских наук, младший научный сотрудник, лаборатория молекулярных и трансляционных исследований

675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22

Ivana Yu. Sugaylo, PhD (Med.), Junior Staff Scientist, Laboratory of Molecular and Translational Research

22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000

ivanka_888@mail.ruГассанД. А.GassanD. A.

Дина Анатольевна Гассан, кандидат медицинских наук, научный сотрудник, лаборатория молекулярных и трансляционных исследований

675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22

Dina A. Gassan, PhD (Med.), Staff Scientist, Laboratory of Molecular and Translational Research

22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000

danishi@mail.ruНаумовД. Е.NaumovD. E.

Денис Евгеньевич Наумов, кандидат медицинских наук, заведующий лабораторией, лаборатория молекулярных и трансляционных исследований

675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22

Denis E. Naumov, PhD (Med.), Head of Laboratory of Molecular and Translational Research

22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000

denn1985@bk.ruКотоваО. О.KotovaO. O.

Олеся Олеговна Котова, кандидат медицинских наук, младший научный сотрудник, лаборатория молекулярных и трансляционных исследований

675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22

Olesya O. Kotova, PhD (Med.), Junior Staff Scientist, Laboratory of Molecular and Translational Research

22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000

foxy_voxy_on@mail.ruГорчаковаЯ. Г.GorchakovaY. G.

Яна Геннадьевна Горчакова, лаборант-исследователь, лаборатория молекулярных и трансляционных исследований

675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22

Yana G. Gorchakova, Research Laboratory Assistant, Laboratory of Molecular and Translational Research

22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000

yana.janet.gorchakova@gmail.comШелудькоЕ. Г.SheludkoE. G.

Елизавета Григорьевна Шелудько, кандидат медицинских наук, научный сотрудник, лаборатория молекулярных и трансляционных исследований

675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22

Elizaveta G. Sheludko, PhD (Med.), Staff Scientist, Laboratory of Molecular and Translational Research

22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000

liza.sheludko@mail.ruФедеральное государственное бюджетное научное учреждение «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания»Far Eastern Scientific Center of Physiology and Pathology of Respiration2023280920230892535Copyright © Сугайло И.Ю., Гассан Д.А., Наумов Д.Е., Котова О.О., Горчакова Я.Г., Шелудько Е.Г., 20232023Сугайло И.Ю., Гассан Д.А., Наумов Д.Е., Котова О.О., Горчакова Я.Г., Шелудько Е.Г.Sugaylo I.Y., Gassan D.A., Naumov D.E., Kotova O.O., Gorchakova Y.G., Sheludko E.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://cfpd.elpub.ru/jour/article/view/1111Введение

Введение. Поддерживая оптимальный трансмембранный электрохимический градиент (ΔΨm), не допускающий избыточного образования активных форм кислорода (АФК), митохондрии обеспечивают энергетический гомеостаз клетки. Однако в условиях патологии нормальная работа митохондрий нарушается, что может приводить к дефициту АТФ и/или повышенной продукции АФК.

Цель

Цель. Изучить показатели ΔΨm и их взаимосвязь с экспрессией каналов TRP в лейкоцитах периферической крови у больных хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ).

Материалы и методы

Материалы и методы. В исследование было включено 23 больных ХОБЛ различной степени тяжести, 8 курящих лиц без признаков бронхиальной обструкции и 9 здоровых, никогда не куривших добровольцев. Всем испытуемым проведена спирометрия для оценки вентиляционной функции легких. Уровень ΔΨm определяли, окрашивая клетки этиловым эфиром тетраметилродамина (TMRE) и измеряя флуоресцентный сигнал с помощью проточной цитометрии, в базальных условиях и на фоне провоспалительной стимуляции с форбол-12-миристат-13-ацетатом (PMA).

Результаты

Результаты. Мы обнаружили, что больные ХОБЛ характеризуются значимым увеличением базального ΔΨm моноцитов (161,8 [153,8; 206,8] против 129,3 [75,5; 161,8], p=0,03) и лимфоцитов (209,7 [184,7; 257,8] против 122,5 [67,9; 164,3], p=0,003) по сравнению с лицами контрольной группы. Стимуляция клеток PMA приводила к разнонаправленным изменениям ΔΨm, при этом его увеличенный уровень при ХОБЛ сохранялся. В моноцитах больных ХОБЛ чаще отмечалось снижение ΔΨm в ответ на стимуляцию PMA (75%), тогда как у большинства (53,9%) лиц контрольной группы ΔΨm, напротив, возрастал (p=0,08). Кроме того, среди больных ХОБЛ возрастание ΔΨm в моноцитах сопровождалось повышенной экспрессией TRPV4, а в группе контроля у лиц с положительной динамикой ΔΨm экспрессия TRPV4 была, наоборот, снижена.

Заключение

Заключение. Повышенный уровень ΔΨm в мононуклеарах больных ХОБЛ согласуется с обнаруженным ранее увеличением продукции АФК, однако не поддерживает предположение о наличии энергетического дефицита в клетках. Выявленные различия во взаимосвязи экспрессии TRPV4 с динамикой ΔΨm могут свидетельствовать о наличии патологических особенностей сигналинга каналов TRP у больных ХОБЛ.

Introduction

Introduction. Mitochondria provide energy homeostasis of the cell by maintaining an optimal transmembrane electrochemical gradient (ΔΨm), which does not allow excessive formation of reactive oxygen species (ROS). However, under conditions of pathology, the normal functioning of mitochondria is disrupted, which can lead to ATP deficiency and/or increased production of ROS.

Aim

Aim. The aim of this study was to investigate the ΔΨm parameters and their relationship with the expression of TRP channels in peripheral blood leukocytes of patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD).

Materials and methods

Materials and methods. The study included 23 patients with COPD of varying severity, 8 smokers without signs of bronchial obstruction and 9 healthy volunteers who had never smoked. All subjects underwent spirometry to assess the lung function. ΔΨm was determined by staining the cells with tetramethylrhodamine ethyl ester (TMRE) and measuring the fluorescent signal by flow cytometry, under basal conditions and pro-inflammatory stimulation with phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA).

Results

Results. We found that COPD patients were characterized by a significant increase in basal ΔΨm of monocytes (161.8 [153.8; 206.8] vs. 129.3 [75.5; 161.8], p=0.03) and lymphocytes (209,7 [184.7; 257.8] vs. 122.5 [67.9; 164.3], p=0.003) as compared with the control group. Stimulation of cells with PMA led to multidirectional changes in ΔΨm, while its increased level was still preserved in COPD. In monocytes of COPD patients, a decrease in ΔΨm in response to PMA stimulation was prevalent (75%), while in the majority (53.9%) of individuals in the control group ΔΨm, on the contrary, increased (p=0.08). In addition, among COPD patients, an increase in ΔΨm in monocytes was accompanied by an enhanced expression of TRPV4, while in the control group, among individuals with positive dynamics of ΔΨm, TRPV4 expression was, on the contrary, reduced.

Conclusion

Conclusion. The increased level of ΔΨm in the mononuclears of COPD patients is consistent with previously detected enhanced ROS production, but does not support the assumption about energy deficit in the cells. The revealed differences in the relationship between TRPV4 expression and ΔΨm dynamics may indicate the presence of pathological features in TRP signaling in COPD patients.

дисфункция митохондрийTRP каналыХОБЛкурениелейкоцитыmitochondrial dysfunctionTRP channelsCOPDsmokingleukocytesReferencesPark S.C., Kim D.W., Park E.C., Shin C.S., Rhee C.K., Kang Y.A., Kim Y.S. Mortality of patients with chronic obstructive pulmonary disease: a nationwide population based cohort study // Korean J. Intern. Med. 2019. Vol.34, Iss.6, P.1272–1278. https://doi.org/10.3904/kjim.2017.428Park S.C., Kim D.W., Park E.C., Shin C.S., Rhee C.K., Kang Y.A., Kim Y.S. Mortality of patients with chronic obstructive pulmonary disease: a nationwide populationbased cohort study. Korean J. Intern. Med. 2019; 34(6):1272–1278. https://doi.org/10.3904/kjim.2017.428Boers E., Barrett M., Vuong V., Benjafield A., Su J., Kaye L., Tellez D., Nunez C., Malhotra A. An estimate of the global COPD prevalence in 2050: Disparities by income and gender // Eur. Respir. J. 2022. Vol.60, Suppl.66. Article number: 4608. https://doi.org/10.1183/13993003.congress-2022.4608Boers E., Barrett M., Vuong V., Benjafield A., Su J., Kaye L., Tellez D., Nunez C., Malhotra A. An estimate of the global COPD prevalence in 2050: Disparities by income and gender. Eur. Respir. J. 2022; 60(66):4608. https://doi.org/10.1183/13993003.congress-2022.4608Chen S., Kuhn M., Prettner K., Yu F., Yang T., Bärnighausen T., Bloom D.E., Wang C. The global economic burden of chronic obstructive pulmonary disease for 204 countries and territories in 2020-50: a health-augmented macroeconomic modelling study // Lancet Glob. Health. 2023. Vol.11, Iss.8. e1183–e1193. https://doi.org/10.1016/S2214-109X(23)00217-6Chen S., Kuhn M., Prettner K., Yu F., Yang T., Bärnighausen T., Bloom D.E., Wang C. The global economic burden of chronic obstructive pulmonary disease for 204 countries and territories in 2020-50: a health-augmented macroeconomic modelling study. Lancet Glob. Health 2023; 11(8):e1183-e1193. https://doi.org/10.1016/S2214-109X(23)00217-6Котова О.О., Гассан Д.А., Сугайло И.Ю., Наумов Д.Е., Горчакова Я.Г., Шелудько Е.Г. Оксидативный стресс в лейкоцитах периферической крови больных хронической обструктивной болезнью легких // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2023. Вып.87. C.62–70. EDN: DPSEOF. https://doi.org/10.36604/1998-5029-2023-87-62-70Kotova O.O., Gassan D.A., Sugaylo I.Yu., Naumov D.E., Gorchakova Y.G., Sheludko E.G. [Oxidative stress in peripheral blood leukocytes of patients with chronic obstructive pulmonary disease]. Bûlleten' fiziologii i patologii dyhaniâ = Bulletin Physiology and Pathology of Respiration 2023; (87):62–70 (in Russian). https://doi.org/10.36604/1998-5029-2023-87-62-70Harper M.E., Bevilacqua L., Hagopian K., Weindruch R., Ramsey J.J. Ageing, oxidative stress, and mitochondrial uncoupling // Acta Physiol. Scand. 2004. Vol.182, Iss.4. P.321–331. https://doi.org/10.1111/j.1365-201X.2004.01370.xHarper M.E., Bevilacqua L., Hagopian K., Weindruch R., Ramsey J.J. Ageing, oxidative stress, and mitochondrial uncoupling. Acta Physiol. Scand. 2004; 182(4):321–331. https://doi.org/10.1111/j.1365-201X.2004.01370.xAntunes M.A., Lopes-Pacheco M., Rocco P.R.M. Oxidative Stress-Derived Mitochondrial Dysfunction in Chronic Obstructive Pulmonary Disease: A Concise Review // Oxid. Med. Cell. Longev. 2021. Vol. 2021. Article number: 6644002. https://doi.org/10.1155/2021/6644002Antunes M.A., Lopes-Pacheco M., Rocco P.R.M. Oxidative Stress-Derived Mitochondrial Dysfunction in Chronic Obstructive Pulmonary Disease: A Concise Review. Oxid. Med. Cell. Longev. 2021; 2021:6644002. https://doi.org/10.1155/2021/6644002Zorova L.D., Popkov V.A., Plotnikov E.Y., Silachev D.N., Pevzner I.B., Jankauskas S.S., Babenko V.A., Zorov S.D., Balakireva A.V., Juhaszova M., Sollott S.J., Zorov D.B. Mitochondrial membrane potential // Anal. Biochem. 2018. Vol.552. P.50–59. https://doi.org/10.1016/j.ab.2017.07.009Zorova L.D., Popkov V.A., Plotnikov E.Y., Silachev D.N., Pevzner I.B., Jankauskas S.S., Babenko V.A., Zorov S.D., Balakireva A.V., Juhaszova M., Sollott S.J., Zorov D.B. Mitochondrial membrane potential. Anal. Biochem. 2018; 552:50– 59. https://doi.org/10.1016/j.ab.2017.07.009Guo C., Sun L., Chen X., Zhang D. Oxidative stress, mitochondrial damage and neurodegenerative diseases // Neural Regen. Res. 2013. Vol.8, Iss.21. P.2003–2014. https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-5374.2013.21.009Guo C., Sun L., Chen X., Zhang D. Oxidative stress, mitochondrial damage and neurodegenerative diseases. Neural Regen. Res. 2013; 8(21):2003–2014. https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-5374.2013.21.009Ogawa N., Kurokawa T., Mori Y. Sensing of redox status by TRP channels // Cell Calcium. 2016. Vol.60, Iss.2. P.115–122. https://doi.org/10.1016/j.ceca.2016.02.009Ogawa N., Kurokawa T., Mori Y. Sensing of redox status by TRP channels. Cell Calcium. 2016; 60(2):115–22. https://doi.org/10.1016/j.ceca.2016.02.009Baş E., Nazıroğlu M., Pecze L. ADP-Ribose and oxidative stress activate TRPM8 channel in prostate cancer and kidney cells // Sci. Rep. 2019. Vol.9, Iss.1. Article number: 4100. https://doi.org/10.1038/s41598-018-37552-0Baş E., Nazıroğlu M., Pecze L. ADP-Ribose and oxidative stress activate TRPM8 channel in prostate cancer and kidney cells. Sci. Rep. 2019; 9(1):4100. https://doi.org/10.1038/s41598-018-37552-0Tian C., Huang R., Tang F., Lin Z., Cheng N., Han X., Li S., Zhou P., Deng S., Huang H., Zhao H., Xu J., Li Z. Transient Receptor Potential Ankyrin 1 Contributes to Lysophosphatidylcholine-Induced Intracellular Calcium Regulation and THP-1-Derived Macrophage Activation // J. Membr. Biol. 2020. Vol.253, Iss.1. P.43–55. https://doi.org/10.1007/s00232-019-00104-2Tian C., Huang R., Tang F., Lin Z., Cheng N., Han X., Li S., Zhou P., Deng S., Huang H., Zhao H., Xu J., Li Z. Transient Receptor Potential Ankyrin 1 Contributes to Lysophosphatidylcholine-Induced Intracellular Calcium Regulation and THP-1-Derived Macrophage Activation. J. Membr. Biol. 2020; 253(1):43–55. https://doi.org/10.1007/s00232-019-00104-2Juárez-Contreras R., Méndez-Reséndiz K.A., Rosenbaum T., González-Ramírez R., Morales-Lázaro S.L. TRPV1 Channel: A Noxious Signal Transducer That Affects Mitochondrial Function // Int. J. Mol. Sci. 2020. Vol.21, Iss.23. Article number: 8882. https://doi.org/10.3390/ijms21238882Juárez-Contreras R., Méndez-Reséndiz K.A., Rosenbaum T., González-Ramírez R., Morales-Lázaro S.L. TRPV1 Channel: A Noxious Signal Transducer That Affects Mitochondrial Function. Int. J. Mol. Sci. 2020; 21(23):8882. https://doi.org/10.3390/ijms21238882Acharya T.K., Kumar S., Rokade T.P., Chang Y.T., Goswami C. TRPV4 regulates mitochondrial Ca2+-status and physiology in primary murine T cells based on their immunological state // Life Sci. 2023. Vol.318. Article number: 121493. https://doi.org/10.1016/j.lfs.2023.121493Acharya T.K., Kumar S., Rokade T.P., Chang Y.T., Goswami C. TRPV4 regulates mitochondrial Ca2+-status and physiology in primary murine T cells based on their immunological state. Life Sci. 2023; 318:121493. https://doi.org/10.1016/j.lfs.2023.121493Pak O., Sommer N., Hoeres T., Bakr A., Waisbrod S., Sydykov A., Haag D., Esfandiary A., Kojonazarov B., Veit F., Fuchs B., Weisel F.C., Hecker M., Schermuly R.T., Grimminger F., Ghofrani H.A., Seeger W., Weissmann N. Mitochondrial hyperpolarization in pulmonary vascular remodeling. Mitochondrial uncoupling protein deficiency as disease model // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2013. Vol.49, Iss.3. P.358–367. https://doi.org/10.1165/rcmb.2012-0361OCPak O., Sommer N., Hoeres T., Bakr A., Waisbrod S., Sydykov A., Haag D., Esfandiary A., Kojonazarov B., Veit F., Fuchs B., Weisel F.C., Hecker M., Schermuly R.T., Grimminger F., Ghofrani H.A., Seeger W., Weissmann N. Mitochondrial hyperpolarization in pulmonary vascular remodeling. Mitochondrial uncoupling protein deficiency as disease model. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2013; 49(3):358–367. https://doi.org/10.1165/rcmb.2012-0361OCWang M., Li G., Yang Z., Wang L., Zhang L., Wang T., Zhang Y., Zhang S., Han Y., Jia L. Uncoupling protein 2 downregulation by hypoxia through repression of peroxisome proliferator-activated receptor γ promotes chemoresistance of non-small cell lung cancer // Oncotarget. 2017. Vol.8, Iss.5. P.8083–8094. https://doi.org/10.18632/oncotarget.14097Wang M., Li G., Yang Z., Wang L., Zhang L., Wang T., Zhang Y., Zhang S., Han Y., Jia L. Uncoupling protein 2 downregulation by hypoxia through repression of peroxisome proliferator-activated receptor γ promotes chemoresistance of non-small cell lung cancer. Oncotarget 2017; 8(5):8083–8094. https://doi.org/10.18632/oncotarget.14097Puente-Maestu L., Pérez-Parra J., Godoy R., Moreno N., Tejedor A., González-Aragoneses F., Bravo J.L., Alvarez F.V., Camaño S., Agustí A. Abnormal mitochondrial function in locomotor and respiratory muscles of COPD patients // Eur. Respir J. 2009. Vol.33, Iss.5. P.1045–1052. https://doi.org/10.1183/09031936.00112408Puente-Maestu L., Pérez-Parra J., Godoy R., Moreno N., Tejedor A., González-Aragoneses F., Bravo J.L., Alvarez F.V., Camaño S., Agustí A. Abnormal mitochondrial function in locomotor and respiratory muscles of COPD patients. Eur. Respir. J. 2009; 33(5):1045–1052. https://doi.org/10.1183/09031936.00112408Agarwal A.R., Kadam S., Brahme A., Agrawal M., Apte K., Narke G., Kekan K., Madas S., Salvi S. Systemic Immuno-metabolic alterations in chronic obstructive pulmonary disease (COPD) // Respir. Res. 2019. Vol.20, Iss.1. Article number: 171. https://doi.org/10.1186/s12931-019-1139-2Agarwal A.R., Kadam S., Brahme A., Agrawal M., Apte K., Narke G., Kekan K., Madas S., Salvi S. Systemic Immuno-metabolic alterations in chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Respir. Res. 2019; 20(1):171. https://doi.org/10.1186/s12931-019-1139-2Бельских Э.С., Урясьев О.М., Звягина В.И., Фалетрова С.В. Развитие вторичной митохондриальной дисфункции мононуклеарных лейкоцитов крови у больных хронической обструктивной болезнью легких и хроническим бронхитом // Казанский медицинский журнал. 2018. Т.99, №5. P.741–747. EDN: YATHSX. https://doi.org/10.17816/KMJ2018-741Bel’skikh E.S., Uryas’ev O.M., Zvyagina V.I., Faletrova S.V. [Development of secondary mitochondrial dysfunction of mononuclear blood leukocytes in patients with chronic obstructive pulmonary disease and chronic bronchitis]. Kazan Medical Journal 2018; 99(5):741–747. https://doi.org/10.17816/KMJ2018-741Abdel-Halim M., Darwish S.S., ElHady A.K., Hoppstädter J., Abadi A.H., Hartmann R.W., Kiemer A.K., Engel M. Pharmacological inhibition of protein kinase C (PKC)ζ downregulates the expression of cytokines involved in the pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease (COPD) // Eur. J. Pharm. Sci. 2016. Vol.93. P.405–409. https://doi.org/10.1016/j.ejps.2016.08.016Abdel-Halim M., Darwish S.S., ElHady A.K., Hoppstädter J., Abadi A.H., Hartmann R.W., Kiemer A.K., Engel M. Pharmacological inhibition of protein kinase C (PKC)ζ downregulates the expression of cytokines involved in the pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Eur. J. Pharm. Sci. 2016; 93:405–409. https://doi.org/10.1016/j.ejps.2016.08.016Wang Y., Biswas G., Prabu S.K., Avadhani N.G. Modulation of mitochondrial metabolic function by phorbol 12- myristate 13-acetate through increased mitochondrial translocation of protein kinase Ca in C2C12 myocytes // Biochem. Pharmacol. 2006. Vol.72, Iss.7. P.881–892. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2006.06.032Wang Y., Biswas G., Prabu S.K., Avadhani N.G. Modulation of mitochondrial metabolic function by phorbol 12- myristate 13-acetate through increased mitochondrial translocation of protein kinase Ca in C2C12 myocytes. Biochem. Pharmacol. 2006; 72(7):881–892. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2006.06.032Zorov D.B., Juhaszova M., Sollott S.J. Mitochondrial ROS-induced ROS release: an update and review // Biochim. Biophys. Acta. 2006. Vol.1757, Iss.5-6. P.509–517. https://doi.org/10.1016/j.bbabio.2006.04.029Zorov D.B., Juhaszova M., Sollott S.J. Mitochondrial ROS-induced ROS release: an update and review. Biochim. Biophys. Acta 2006; 1757(5-6):509–517. https://doi.org/10.1016/j.bbabio.2006.04.029Agudo-López A., Miguel B.G., Fernández I., Martínez A.M. Role of protein kinase C and mitochondrial permeability transition pore in the neuroprotective effect of ceramide in ischemia-induced cell death // FEBS Lett. 2011. Vol.585, Iss.1. P.99–103. https://doi.org/10.1016/j.febslet.2010.11.015Agudo-López A., Miguel B.G., Fernández I., Martínez A.M. Role of protein kinase C and mitochondrial permeability transition pore in the neuroprotective effect of ceramide in ischemia-induced cell death. FEBS Lett. 2011; 585(1):99– 103. https://doi.org/10.1016/j.febslet.2010.11.015Brady N.R., Elmore S.P., van Beek J.J., Krab K., Courtoy P.J., Hue L., Westerhoff H.V. Coordinated behavior of mitochondria in both space and time: a reactive oxygen species-activated wave of mitochondrial depolarization // Biophys. J. 2004. Vol.87, Iss.3. P.2022–2034. https://doi.org/10.1529/biophysj.103.035097Brady N.R., Elmore S.P., van Beek J.J., Krab K., Courtoy P.J., Hue L., Westerhoff H.V. Coordinated behavior of mitochondria in both space and time: a reactive oxygen species-activated wave of mitochondrial depolarization. Biophys. J. 2004; 87(3):2022–2034. https://doi.org/10.1529/biophysj.103.035097Numazaki M., Tominaga T., Toyooka H., Tominaga M. Direct phosphorylation of capsaicin receptor VR1 by protein kinase Cepsilon and identification of two target serine residues // J. Biol. Chem. 2002. Vol.277, Iss.16. P.13375–13378. https://doi.org/10.1074/jbc.C200104200Numazaki M., Tominaga T., Toyooka H., Tominaga M. Direct phosphorylation of capsaicin receptor VR1 by protein kinase Cepsilon and identification of two target serine residues. J. Biol. Chem. 2002; 277(16):13375–13378. https://doi.org/10.1074/jbc.C200104200Fan H.C., Zhang X., McNaughton P.A. Activation of the TRPV4 ion channel is enhanced by phosphorylation // J. Biol. Chem. 2009. Vol.284, Iss.41. P.27884–27891. https://doi.org/10.1074/jbc.M109.028803Fan H.C., Zhang X., McNaughton P.A. Activation of the TRPV4 ion channel is enhanced by phosphorylation. J. Biol. Chem. 2009; 284(41):27884–27891. https://doi.org/10.1074/jbc.M109.028803

The authors declare that there are no conflicts of interest present.