МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ЭФФЕКТЫ ЭРИТРОПОЭТИНА НА ЛИПИДНЫЙ СОСТАВ МЕМБРАНЫ ЭРИТРОЦИТОВ КРОВИ ПУПОВИНЫ НОВОРОЖДЕННЫХ ПРИ ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ПЕРИОД БЕРЕМЕННОСТИ

С целью выявления молекулярных эффектов действия эритропоэтина на липидный состав и свойства мембраны эритроцитов крови пуповины обследовано 35 новорожденных детей, рожденных от серопозитивных по цитомегаловирусу женщин с обострением инфекции в третьем триместре беременности (основная группа). Контрольную группу составили 30 новорожденных, рожденных от серонегативных по цитомегаловирусу женщин. Материалом для исследования служили плазма и эритроциты крови пуповины. В мембране эритроцитов крови пуповины методом спектрофотомерии исследовали продукты, реагирующие с тиобарбитуровой кислотой; микровязкость мембраны изучали методом латеральной диффузии гидрофобного флуоресцентного зонда пирен; содержание лизофосфатидилхолина - методом тонкослойной хроматографии; арахидоновой, олеиновой и α-линоленовой жирных кислот - методом газовой хроматографии; ионизированного кальция - на анализаторе газов крови и электролитов; эритропоэтин в плазме крови пуповины - иммуноферментным методом анализа. Количество эритроцитов определяли на гематологическом автоматическом анализаторе. Морфологию эритроцитов и подсчет эхиноцитов проводили методом световой микроскопии c последующей цитофотометрической обработкой данных. В крови пуповины новорожденных, рожденных от серопозитивных по цитомегаловирусу женщин с обострением инфекции в третьем триместре беременности, установлено увеличение уровня эритропоэтина на 20% (p<0,05), количества эритроцитов - на 21% (p<0,01), продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой - на 60% (p<0,001), лизофосфатидилхолина - на 42% (p<0,001), арахидоновой кислоты - на 31% (p<0,001), ионизированного кальция - на 14% (p<0,05), количества эхиноцитов - на 91% (p<0,001), при уменьшении содержания олеиновой и α-линоленовой жирных кислот на 40% (p<0,001), отношения флюоресценции эксимеров и мономеров (Fe/Fm) - на 30% (p<0,001), количества эритроцитов - на 21% (p<0,01). Полученные результаты свидетельствовали о развитии у новорожденных, рожденных от серопозитивных по цитомегаловирусу женщин с обострением инфекции в третьем триместре беременности, неэффективного эритропоэза, усиливающего окислительное повреждение эритроцитов, что приводило к эхиноцитозу и эриптозу.

новорожденные, кровь пуповины, цитомегаловирусная инфекция, эритропоэтин, окислительный стресс, эриптоз

1. Андриевская И.А., Луценко М.Т. Влияние иммунного статуса на эритропоэтическую функцию крови рожениц при цитомегаловирусной инфекции во время беременности // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2010. Вып.38. С.54-57.

2. Гаврилов В.Б., Гаврилова А.Р., Мажуль Л.М. Анализ методов определения продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови по тесту с тиобарбитуровой кислотой // Вопросы медицинской химии. 1987. Т. 33, №1. С.118-121.

3. Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании клеток, мембран и липопротеинов. М.: Наука, 1989. 277 c.

4. Ишутина Н.А. Активность фосфолипазы А2 и состояние процессов перекисного окисления липидов в периферической крови у беременных с герпес-вирусной инфекцией // Успехи современного естествознания. 2013. №2. С.12-14.

5. Каткова Н.Ю., Марьямова Н.А., Малышев В.В., Романцов М.Г. Исследование антиоксидантного статуса у беременных с фетоплацентарной недостаточностью из групп риска по внутриутробному инфицированию плода // Вестник Санкт-Петербургской государственной медицинской академии имени И.И.Мечникова. 2008. №4. С.60-63.

6. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография: в 2-х т. М.: Мир, 1981. Т.1. С.52-115.

7. Луценко М.Т., Андриевская И.А., Ишутина Н.А., Мироненко А.Г. Механизмы формирования гипоксии в период беременности и нарушение кровоснабжения плода при цитомегаловирусной инфекции // Вестник Российской Академии Медицинских Наук. 2015. T.70, №1. С.106-112. doi: 10.15690/vramn.v70i1.1239

8. Мартусевич А.К., Карузин К.А. Оксидативный стресс и его роль в формировании дизадаптации и патологии // Биорадикалы и антиоксиданты. 2015. Т.2, №2. С.5-18.

9. Петров Ю.А., Блесманович А.Е., Алехина А.Г. Беременность, роды, состояние плода и новорожденного у матерей с цитомегаловирусной инфекцией (обзор литературы) // Здоровье и образование в 21 веке. 2018. № 20(5). С.20-24. doi.org/10.26787/nydha-2226-7425-2018-20-5-20-24

10. Bissinger R., Modicano P., Frauenfeld L., Lang E., Jacobi J., Faggio C., Lang F. Estramustine-induced suicidal erythrocyte death // Cell. Physiol. Biochem. 2013. Vol.32, №5. P.1426-1436.

11. Diepenbroek M., Casadei N., Esmer H., Saido T.C., Takano J., Kahle P.J., Nixon R.A., Rao M.V., Melki R., Pieri L., Helling S., Marcus K., Krueger R., Masliah E., Riess O., Nuber S. Overexpression of the calpain-specific inhibitor calpastatin reduces human alpha-Synuclein processing, aggregation and synaptic impairment in alphaSyn transgenic mice // Hum. Mol. Genet. 2014. Vol.23, №15. P.3975-3989. doi: 10.1093/hmg/ddu112

12. d'Uscio L.V., Smith L.A., Katusic Z.S. Erythropoietin increases expression and function of vascular copper- and zinc-containing superoxide dismutase // Hypertension. 2010. Vol.55, №4. P.998-1004. doi: 10.1161/HYPERTENSIONAHA.110.150623

13. Fisher J.W. Erythropoietin: physiology and pharmacology update // Exp. Biol. Med. (Maywood). 2003. Vol.228, №1. P.1-14.

14. Kasinathan R.S., Föller M., Koka S., Huber S.M., Lang F. Inhibition of eryptosis and intraerythrocytic growth of Plasmodium falciparum by flufenamic acid // Naunyn-Schmiedeberg's archives of pharmacology. 2007. Vol.374. P.255-264. doi: 10.1007/s00210-006-0122-x

15. Lang E., Qadri S.M., Lang F. Killing me softly-suicidal erythrocyte death // Int. J. Biochem. Cell. Biol. 2012. Vol.44, №8. P.1236-1243. doi: 10.1016/j.biocel.2012.04.019

16. Lang F., Abed M., Lang E, Föller M. Oxidative stress and suicidal erythrocyte death // Antioxid. Redox Signal. 2014. Vol.21, №1. P.138-153. doi: 10.1089/ars.2013.5747

17. Lang F., Qadri S.M. Mechanisms and significance of eryptosis, the suicidal death of erythrocytes // Blood Purif. 2012. Vol.33, №1-3. P. 125-130. doi: 10.1159/000334163

18. Lang N.N., Connelly D.T. Novel oral anticoagulants for the prevention of thromboembolism in patients with atrial fibrillation // J. R. Coll. Physicians Edinb. 2013. Vol.43, №2. P.151-158. doi: 10.4997/JRCPE.2013.213

19. Lucenko M.T., Andrievskaya I.A. Circulating immune complexes in pregnancy complicated by chronic cytomegalovirus infection // International Journal of Biomedicine. 2013. Vol.3, №3. P.174-176.

20. Mitra A., Bansal S., Wang W., Falk S., Zolty E., Schrier R.W. Erythropoietin ameliorates renal dysfunction during endotoxaemia // Nephrol. Dial. Transplant. 2007. Vol.22, №8. P.2349-2353. doi.org/10.1093/ndt/gfm216

21. Toba H., Kojima Y., Wang J., Noda K., Tian W., Kobara M., Nakata T. Erythropoietin attenuated vascular dysfunction and inflammation by inhibiting NADPH oxidase-derived superoxide production in nitric oxide synthase-inhibited hypertensive rat aorta // Eur. J. Pharmacol. 2012. Vol.691, №.1-3. P.190-197. doi: 10.1016/j.ejphar.2012.07.018

22. Wieder T., Lang P.A., Lang K.S., Kempe D.S., Niemoeller O.M., Duranton C., Gulbins E., Huber S.M, Lang F. Studying Mechanisms of Eryptosis // Cytotechnology. 2005. Vol.49, №2-3. P.117-132. doi: 10.1007/s10616-006-6335-5

23. Andrievskaya I.A., Lutsenko M.T. Influence of immune status on erythropoiesis function of blood of parturient women at herpes virus infection during pregnancy. Bulleten' fiziologii i patologii dyhaniâ 2010; 38:54-57 (in Russian).

24. Gavrilov V.В., Gavrilova A.R., Mazhul’ L.M. Analysis of methods for determining the products of lipid peroxidation in serum according to the test with thiobarbituric acid. Voprosy meditsinskoy khimii 1987; 33(1):118-121 (in Russian).

25. Dobretsov G.E. Fluorescent probes in the study of cell, membranes and lipoproteins. Moscow: Nauka; 1989 (in Russian).

26. Ishutina N.A. Activity phospholipase A2 and state of processes of peroxide oxidation of lipids in the peripheric blood at pregnant with the herpes-virus infection contamination. Uspekhi sovremennogo estestvoznaniya 2013; 2:12-14 (in Russian).

27. Katkova N.Yu., Mariamova N.A., Malyshev V.V.1, Romantsov M.G. Antioxidant status study in pregnant women with fetoplacental insufficiency from risk group of intrautenine fetus infection. Vestnik Sankt-Peterburgskoy gosudarstvennoy meditsinskoy akademii imeni I.I.Mechnikova 2008; 4:60-63 (in Russian).

28. Kirchner J.G. Thin-layer chromatography. Moscow: Mir; 1981. Vol.1 (in Russian).

29. Lutsenko M.T., Andrievskaya I.A., Ishutina N.A., Mironenko A.G. Mechanisms of hypoxia development during pregnancy and the disorder of fetus blood supply at cytomegalovirus infection. Vestnik Rossiyskoy Akademii Meditsinskikh Nauk 2015; 70(1):106-112 (in Russian). doi: 10.15690/vramn.v70i1.1239

30. Martusevich A.K., Karuzin K.A. Oxidative stress and its role in the formation of disadaptation and pathology. Bioradikaly i antioksidanty 2015; 2(2):5-18 (in Russian).

31. Petrov Yu.A., Blesmanovich A.E., Alekhina A.G. Pregnancy, childbirth, a fetus newborn from mothers with cytomegalovirus infectio (review). The Journal of scientific articles “Health and Education Millennium” 2018; 20(5):20-24. http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2226-7425-2018-20-5-20-24 (in Russian).

32. Bissinger R., Modicano P., Frauenfeld L., Lang E., Jacobi J., Faggio C., Lang F. Estramustine-induced suicidal erythrocyte death. Cell. Physiol. Biochem. 2013; 32(5):1426-1436.

33. Diepenbroek M., Casadei N., Esmer H., Saido T.C., Takano J., Kahle P.J., Nixon R.A., Rao M.V., Melki R., Pieri L., Helling S., Marcus K., Krueger R., Masliah E., Riess O., Nuber S. Overexpression of the calpain-specific inhibitor calpastatin reduces human alpha-Synuclein processing, aggregation and synaptic impairment in alphaSyn transgenic mice. Hum. Mol. Genet. 2014; 23(15):3975-3989. doi: 10.1093/hmg/ddu112

34. d'Uscio L.V., Smith L.A., Katusic Z.S. Erythropoietin increases expression and function of vascular copper- and zinc-containing superoxide dismutase. Hypertension 2010; 55(4):998-1004. doi: 10.1161/HYPERTENSIONAHA.110.150623

35. Fisher J.W. Erythropoietin: physiology and pharmacology update. Exp. Biol. Med. (Maywood) 2003; 228(1):1-14.

36. Kasinathan R.S., Föller M., Koka S., Huber S.M., Lang F. Inhibition of eryptosis and intraerythrocytic growth of Plasmodium falciparum by flufenamic acid. Naunyn-Schmiedeberg's archives of pharmacology 2007; 374:255-264. doi: 10.1007/s00210-006-0122-x

37. Lang E., Qadri S.M., Lang F. Killing me softly-suicidal erythrocyte death. Int. J. Biochem. Cell. Biol. 2012; 44(8):1236-1243. doi: 10.1016/j.biocel.2012.04.019

38. Lang F., Abed M., Lang E, Föller M. Oxidative stress and suicidal erythrocyte death. Antioxid. Redox Signal. 2014; 21(1):138-153. doi: 10.1089/ars.2013.5747

39. Lang F., Qadri S.M. Mechanisms and significance of eryptosis, the suicidal death of erythrocytes. Blood Purif. 2012; 33(1-3):125-130. doi: 10.1159/000334163

40. Lang N.N., Connelly D.T. Novel oral anticoagulants for the prevention of thromboembolism in patients with atrial fibrillation. J. R. Coll. Physicians Edinb. 2013; 43(2):151-158. doi: 10.4997/JRCPE.2013.213

41. Lucenko M.T., Andrievskaya I.A. Circulating immune complexes in pregnancy complicated by chronic cytomegalovirus infection. International Journal of Biomedicine 2013; 3(3):174-176.

42. Mitra A., Bansal S., Wang W., Falk S., Zolty E., Schrier R.W. Erythropoietin ameliorates renal dysfunction during endotoxaemia. Nephrol. Dial. Transplant. 2007; 22(8):2349-2353. doi.org/10.1093/ndt/gfm216

43. Toba H., Kojima Y., Wang J., Noda K., Tian W., Kobara M., Nakata T. Erythropoietin attenuated vascular dysfunction and inflammation by inhibiting NADPH oxidase-derived superoxide production in nitric oxide synthase-inhibited hypertensive rat aorta. Eur. J. Pharmacol. 2012; 691(1-3):190-197. doi: 10.1016/j.ejphar.2012.07.018

44. Wieder T., Lang P.A., Lang K.S., Kempe D.S., Niemoeller O. M., Duranton C., Gulbins E., Huber S.M, Lang F. Studying Mechanisms of Eryptosis. Cytotechnology 2005; 49(2-3):117-132. doi: 10.1007/s10616-006-6335-5