НОВЫЙ МЕТОД ИЗУЧЕНИЯ УЛЬТРАСТРУКТУРНОЙ ПРОСТРАНСТВЕННОЙ ОРГАНИЗАЦИИ ПОКРОВНОГО ЭПИТЕЛИЯ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ТРАХЕИ

Цель исследования - с помощью нового подхода установить трехмерную пространственную организацию реснитчатого эпителия трахеи интактных крыс. Продемонстрировано, что объемная электронная микроскопия, или сканирующая электронная микроскопия с применением фокусированного ионного пучка - перспективный метод исследования биологических объектов. Послойное травление поперечного среза зафиксированного и контрастированного препарата биологической ткани фокусированным ионным пучком с последующей визуализацией структуры с детектором обратноотраженных электронов в двухлучевой системе FIB/SEM позволяет адекватно восстановить трехмерную структуру объекта из большой серии электронно-микроскопических изображений последовательных поперечных срезов. Полученная при этом структурная информация позволяет визуализировать сложную микроанатомию тканей на субклеточном уровне. В результате выполненных 3D-реконструкций получена информация о топологии компартментов реснитчатых эпителиальных клеток слизистой оболочки трахеи крыс и пространственной геометрии ультраструктур, визуализированы внутриклеточные структуры, реконструировано тонкое строение субмикроскопических деталей поверхности эпителия трахеи - ресничек и микроворсинок.

3D-реконструкции, реснитчатые клетки, покровный эпителий трахеи

1. ВидеоТесТ-Морфология. URL: http:www.videotest.ru/ru/app/179 (дата обращения: 02.08.2012).

2. Количественный анализ изменения объема бластомера мыши в результате осмотического шока: 3-D реконструкция и лазерная сканирующая микроскопия / А.Г.Погорелов [и др.] // Цитология. 2007. Т.49, №9. C.784.

3. Савостьянов Г.А. Основы структурной гистологии. Пространственная организация эпителиев. СПб.: Наука, 2005. 375 с.

4. Шкловер В.Я., Казанский П.Р., Целуйко С.С. 3D-реконструкция биологических объектов с использованием системы Dual Beam FIB/SEM Quanta 3D FEG // XXIV Российская конференция по электронной микроскопии: тезисы докладов. Черноголовка, 2012. С.511.

5. Ultrastructure and stereology of cardiomyocytes in the development of regenerative and plastic myocardial insufficiency during ontogeny / L.M.Nepomnyashchikh [et al.] // Bull. Exp. Biol. Med. 2011. Vol.151, №1. P.88-94.

6. VideoTesT-Morfologiya [VideoTesT-Morphology]. Available at: http:www.videotest.ru/ru/app/179 (accessed 02 August 2012).

7. Pogorelov A.G., Aksirov A.M., Golichenkov V.A., Pogorelova M.A., Yashin V.A. Tsitologiya 2007; 49(9):784.

8. Savost'yanov G.A. Osnovy strukturnoy gistologii. Prostranstvennaya organizatsiya epiteliev [The basics of structural histology. Spatial organization of epithelium]. St. Petersburg: Nauka; 2005.

9. Shklover V.Ya., Kazanskiy P.R., Tseluyko S.S. XXIV Rossiyskaya konferentsiya po elektronnoy mikroskopii: tezisy dokladov (XXIV Russian conference on electronic microscopy: abstracts). Chernogolovka; 2012: p.511.

10. Nepomnyashchikh L.M., Lushnikova E.L., Molodykh N.A., Klinnikova M.G., Molodykh O.P. Ultrastructure and stereology of cardiomyocytes in the development of regenerative and plastic myocardial insufficiency during ontogeny. Bull. Exp. Biol. Med. 2011; 151(1):88-94.