Профили фосфолипидов и содержание аннексина V в ворсинчатом хорионе от женщин с самопроизвольным выкидышем, ассоциированным с цитомегаловирусной инфекцией

Цель. Провести сравнительный анализ профилей фосфолипидов и содержания аннексина V в ворсинчатом хорионе от женщин с самопроизвольным выкидышем, ассоциированным с обострением цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ), и женщин физиологическим течением беременности.

Материалы и методы. Методом случайной выборки были отобраны 66 пациенток на сроке беременности 6-8 недель. Была выявлена контрольная группа в количестве 32 здоровых беременных женщин без ЦМВИ с медицинским абортом. Основную группу исследования составили 34 женщины с самопроизвольным выкидышем, ассоциированным с обострением ЦМВИ. Материалом для исследования явился ворсинчатый хорион, периферическая кровь и моча. В сыворотке крови методом твердофазного иммуноферментного анализа определяли типоспецифические антитела к ЦМВ, иммуноглобулины класса M и G и индекс авидности. Липиды в гомогенате ворсинчатого хориона экстрагировали хлороформ-метаноловой смесью, фосфолипиды фракционировали методом тонкослойной хроматографии. Количественное определение аннексина V проводили методом иммуноферментного анализа.

Результаты. Фосфолипидный профиль ворсинчатого хориона в основной группе характеризовался снижением фракции фосфатидилхолина до 22,39±0,04% (контрольная группа – 28,50±0,052%; p<0,001), фосфатидилэтаноламина до 27,63±0,011% (контрольная группа – 30,11±0,073%; p<0,001), фосфатидилинозитола до 14,24±0,021% (контрольная группа – 16,17±0,018%; p<0,001), повышением лизофосфатидилхолина до 2,25±0,032% (контрольная группа – 1,07±0,022%; p<0,001), фосфатидилсерина до 18,92±0,012% (контрольная группа – 10,02±0,012%; p<0,001), сфингомиелина до 18,92±0,012% (контрольная группа – 14,13±0,012%; p<0,001). Обращало внимание повышение содержания аннексина V с 20,21±0,50 Ед/мл в контрольной группе до 43,12±0,50 Ед/мл в основной группе (p<0,001). Одновременно выявлено повышение содержания аннексина V до 43,12±0,50 Ед/мл (контрольная группа – 20,21±0,50 Ед/мл; p<0,001).

Заключение. Результаты выполненного исследования показали, что в ворсинчатом хорионе от женщин с самопроизвольным абортом, ассоциированным с обострением ЦМВИ, отмечено изменение профиля и соотношения фосфолипидов, а также концентрации аннексина V. Установленное повышение содержания в ворсинчатом хорионе фосфатидилсерина и связанного с ним аннексина V свидетельствует о нарушении системы гемостаза и микроциркуляции вследствие усиления тромбообразования, поддерживающего локальное воспаление и апоптоз трофобласта, что приводит к гибели эмбриона и самопроизвольному аборту.

1. Айламазян Э.К., Степанова О.И., Сельков С.А., Соколов Д.И. Клетки иммунной системы матери и клетки трофобласта: «конструктивное сотрудничество» ради достижения совместной цели // Вестник Российской академии медицинских наук. 2013. Т.68, №11. С.12–21. https://doi.org/10.15690/vramn.v68i11.837

2. Дубоссарская З.М. Клеточно-молекулярные диалоги в эндометрии и плаценте при физиологической и патологической беременности (обзор литературы) // Жіночий Лікар. 2012. №3. С.34–38.

3. Singh A.T., Dharmarajan A., Aye I.L., Keelan J.A. Sphingosine-sphingosine-1-phosphate pathway regulates trophoblast differentiation and syncytialization // Reprod. Biomed. Online. 2012. Vol.24, №2. P.224–234. https://doi.org/10.1016/j.rbmo.2011.10.012

4. Dunlap K.A., Kwak H.I., Burghardt R.C., Bazer F.W., Magness R.R., Johnson G.A., Bayless K.J. The sphingosine 1-phosphate (S1P) signaling pathway is regulated during pregnancy in sheep // Biol Reprod. 2010. Vol.82, №5. P.876–887. https://doi. org/10.1095/biolreprod.109.081604

5. Pandya A.D., Das M.K., Sarkar A., Vilasagaram S., Basak S., Duttaroy A.K. Tube formation in the first trimester placental trophoblast cells: Differential effects of angiogenic growth factors and fatty acid // Cell. Biol. Int. 2016. Vol.40, №6. P.652–661. https://doi.org/10.1002/cbin.10601

6. Yasuda D., Kobayashi D., Akahoshi N., Ohto-Nakanishi T., Yoshioka K., Takuwa Y., Mizuno S., Takahashi S., Ishii S. Lysophosphatidic acid-induced YAP/TAZ activation promotes developmental angiogenesis by repressing Notch ligand Dll4 // J. Clin. Invest. 2019. Vol.129, №10. P.4332–4349. https://doi.org/10.1172/JCI121955

7. Chen S.U., Lee H., Chang D.Y., Chou C.H., Chang C.Y., Chao K.H., Lin C.W., Yang Y.S. Lysophosphatidic acid mediates interleukin-8 expression in human endometrial stromal cells through its receptor and nuclear factor-kappaB-dependent pathway: a possible role in angiogenesis of endometrium and placenta // Endocrinology. 2008. Vol.149, №11. P.5888–5896. https://doi.org/10.1210/en.2008-0314

8. Omatsu K., Kobayashi T., Murakami Y., Suzuki M., Ohashi R., Sugimura M., Kanayama N. Phosphatidylserine/phosphatidylcholine microvesicles can induce preeclampsia-like changes in pregnant mice // Semin. Thromb. Hemost. 2005. Vol.31, №3. P.314–320. https://doi.org/10.1055/s-2005-872438

9. Crocker I.P., Cooper S., Ong S.C., Baker P.N. Differences in apoptotic susceptibility of cytotrophoblasts and syncytiotrophoblasts in normal pregnancy to those complicated with preeclampsia and intrauterine growth restriction // Am. J. Pathol. 2003. Vol.162, №2. P.637–643. https://doi.org/10.1016/S0002-9440(10)63857-6

10. Луценко М.Т., Андриевская И.А. Реализация апоптоза в ядрах синцитиотрофобласта ворсинок плаценты у беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции в зависимости от содержания в гомогенате плаценты аннексина V // Бюллетень сибирской медицины. 2010. Т.9, №1. С.45–48. https://doi.org/10.20538/1682-0363-2010-1-45-48

11. Baig S., Lim J.Y., Fernandis A.Z., Wenk M.R., Kale A., Su L.L., Biswas A., Vasoo S., Shui G., Choolani M. Lipidomic analysis of human placental syncytiotrophoblast microvesicles in adverse pregnancy outcomes // Placenta. 2013. Vol.34, №5. P.436–442. https://doi.org/10.1016/j.placenta.2013.02.004

12. Brown S.H., Eather S.R., Freeman D.J., Meyer B.J., Mitchell T.W. A Lipidomic Analysis of Placenta in Preeclampsia: Evidence for Lipid Storage. PLoS One. 2016. Vol.11, №9. e0163972. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163972

13. Folch J., Lees M., Sloane G.H. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animals tissues // Biol. Chem. 1957. Vol.226, №1. P.497–509.

14. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография: пер.с. англ. М.: Мир, 1981. Т.1. 616 с.

15. Thulin A.J., Allee G.L., Harmon D.L., Davis D.L. Utero-placental transfer of octanoic, palmitic and linoleic acids during late gestation in gilts // J. Anim. Sci. 1989. Vol.67, №3. P.738–745. https://doi.org/10.2527/jas1989.673738x

16. Погорелова Т.Н., Линде В.А., Гунько В.О., Крукиер И.И., Селютина С.Н. Mетаболизм, транспорт и состав липидов в плаценте // Фундаментальные исследования. 2015. №2-26. С.5832–5836. URL: http://www.fundamentalresearch.ru/ru/article/view?id=38513

17. Chen S., Wang J., Wang M., Lu J., Cai Y., Li B. In vitro fertilization alters phospholipid profiles in mouse placenta // J. Assist. Reprod. Genet. 2019. Vol.36, №3. P.557–567. https://doi.org/10.1007/s10815-018-1387-y

18. Зубжицкая Л.Б., Кошелева Н.Г., Семенов В.В. Иммуноморфологическое состояние плаценты при акушерской патологии / под ред. Э.К.Айламазяна. СПб.: Нормиздат, 2005. 304 с. ISBN 5-98306-014-7

19. Ишутина Н.А. Роль нарушений состава фосфолипидов в патогенезе цитомегаловирусной инфекции // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. 2015. №3(103). C.52–55.

20. Тюрина Е.П., Котлова Е.В., Власов А.П., Ледяйкина Л.В., Гордеева Ю.В. Изменение липидного метаболизма плаценты у беременных с гестозом // Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. Медицинские науки. 2011. №4(20). С.89–95.

21. Коновалова Т.Т., Смирнова И.П. Роль липидов в структурно-функциональной организации клеточных мембран при атеросклерозе и их коррекция у больных ишемической болезнью сердца (сообщение 2) // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). 2005. Т.55, №6. С.8–14.

22. Андриевская И.А. Механизмы и закономерности развития нарушений морфофункционального состояния плаценты и кислородтранспортной функции периферической крови рожениц и крови пуповины при обострении герпес-вирусной инфекции: автореф. дис. … д-ра биол. наук. Иркутск, 2011. 50 с.

23. Kagan V.E., Fabisiak J.P., Shvedova A.A., Tyurina Y.Y., Tyurin V.A., Schor N.F, Kawai K. Oxidative signaling pathway for externalization of plasma membrane phosphatidylserine during apoptosis // FEBS Lett. 2000. Vol.477(1-2). P.1–7. https://doi.org/10.1016/s0014-5793(00)01707-5

24. Hankins H.M., Baldridge R.D., Xu P., Graham T.R. Role of flippases, scramblases and transfer proteins in phosphatidylserine subcellular distribution // Traffic. 2015. Vol.16, №1.35–47. https://doi.org/10.1111/tra.12233

25. Yap T.E., Davis B.M., Guo L., Normando E.M., Cordeiro M.F. Annexins in Glaucoma // Int. J. Mol. Sci. 2018. Vol.19, №4. Article number 1218. https://doi.org/10.3390/ijms19041218

26. Martin M., Leffler J., Blom A.M. Annexin A2 and A5 serve as new ligands for C1q on apoptotic cells // J. Biol. Chem. 2012. Vol. 287, №40. P.33733–33744. https://doi.org/10.1074/jbc.M112.341339

27. Андриевская И.А., Ишутина Н.А., Кутепова О.Л. Свободнорадикальное окисление и оксигенация гемоглобина при обострении цитомегаловирусной инфекции во втором триместре беременности // Acta Biomedica Scientifica (East Siberian Biomedical Journal). 2018. Т.3, №4. С.9−14. doi: 10/29413/ABS.2018-3.4.1

28. Ишутина Н.А., Андриевская И.А., Довжикова И.В., Дорофиенко Н.Н., Гориков И.Н. Взаимосвязь окислительного стресса, дисбаланса жирных кислот в реализации апоптоза в плаценте при цитомегаловирусной инфекции в первом триместре беременности // Acta biomedica sсientifica (East Siberian Biomedical Journal). 2019. Т.4, № 2. С. 16–22. https://doi.org/10.29413/ABS.2019-4.2.2